文章摘要
郑琦,蔡佳,汤菊芬,鲁义善,吴灶和,简纪常.红笛鲷LITAF基因的克隆与表达分析[J].上海海洋大学学报,2016,25(1):18-24
红笛鲷LITAF基因的克隆与表达分析
Molecular cloning and expression analysis of LITAF in Lutjanus sanguineus
投稿时间:2015-04-20  修订日期:2015-06-05
DOI:10.12024/jsou.20150401413
中文关键词: 红笛鲷  LITAF基因  克隆  表达分析
英文关键词: Lutjanus sanguineus  LITAF  cloning  expression analysis
基金项目:国家自然科学基金(31402335,41406172);广东省科技厅国际合作项目(2012B050600029);广东高校国际合作创新平台项目(2013gjhz0008);广东海洋大学创新强校工程(GDOU2013050231)
作者单位E-mail
郑琦 广东海洋大学 水产学院, 广东 湛江 524088  
蔡佳 广东海洋大学 水产学院, 广东 湛江 524088
广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室, 广东 湛江 524088
广东省水产经济动物病害控制重点实验室, 广东 湛江 524088 
matrix924@foxmail.com 
汤菊芬 广东海洋大学 水产学院, 广东 湛江 524088
广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室, 广东 湛江 524088
广东省水产经济动物病害控制重点实验室, 广东 湛江 524088 
 
鲁义善 广东海洋大学 水产学院, 广东 湛江 524088
广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室, 广东 湛江 524088
广东省水产经济动物病害控制重点实验室, 广东 湛江 524088 
 
吴灶和 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室, 广东 湛江 524088
广东省水产经济动物病害控制重点实验室, 广东 湛江 524088 
 
简纪常 广东海洋大学 水产学院, 广东 湛江 524088
广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室, 广东 湛江 524088
广东省水产经济动物病害控制重点实验室, 广东 湛江 524088 
 
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中文摘要:
      通过同源克隆和RACE PCR技术从红笛鲷脾脏中鉴定得到了脂多糖诱导的肿瘤坏死因子(LITAF)基因,命名为Ls-LITAF。该基因cDNA全长815 bp,开放阅读框为447 bp,编码148个氨基酸,理论分子量为15.7 ku。序列分析显示Ls-LITAF蛋白具有保守的LITAF结构域,其中包含一个CXXC基序与一个(H)xCxxC基序。Ls-LITAF蛋白与其他鱼类LITAF蛋白相似度较高,在系统进化树中也与其他鱼类该蛋白聚为一支。Ls-LITAF基因在健康鱼体多种组织均有表达,其中鳃、脾脏、皮肤与头肾的表达量较高;且哈氏弧菌刺激鱼体后,Ls-LITAF在脾脏和头肾中的表达量显著上调。以上研究结果为进一步了解Ls-LITAF在红笛鲷免疫反应中的作用提供了参考。
英文摘要:
      The lipopolysaccharide-induced TNF-α factor (LITAF) gene was identified from humphead snapper (Lutjanus sanguineus) spleen using homologous cloning and RACE PCR, designated as Ls-LITAF. The full length cDNA of Ls-LITAF was 815 bp, contained an ORF of 447 bp encoding a polypeptide of 148 amino acids with predicted molecular mass of 15.7 ku. Sequence alignment showed that Ls-LITAF possessed a typical LITAF domain with a CXXC and (H)xCxxC motif, shared high similarities with other fish LITAF proteins. Phylogenetic analysis indicated that Ls-LITAF clustered closely with known fish LITAFs. Ls-LITAF was distributed in all analyzed tissues with higher expressions in gill, spleen, skin and head kidney. After Vibrio harveyi infection, the expression levels of Ls-LITAF were up-regulated significantly in spleen and head kidney. These results provided a reference to further investigate the roles of Ls-LITAF in immune response of Lutjanus sanguineus.
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